原核表达系统蛋白制备服务
- SERVICE -

原核表达系统蛋白制备服务

大肠杆菌蛋白表达系统是目前应用最广泛及最经济实惠的蛋白表达系统。E. coli遗传背景清楚、细胞增殖快、表达水平高、稳定性好、成本低、周期短,适用于多种属蛋白的表达。

瀚海新酶提供从密码子优化到重组蛋白表达/纯化/规模化制备的一站式服务以及内毒素去除等附加服务。

丰富的蛋白表达平台和技术储备
· 拥有理性设计、定向进化分子设计平台,高效、精准实现基因序列设计和优化
· 拥有自主开发和其他常用原核表达载体库和宿主细胞库,可适配不同类型蛋白的表达
· 原核细胞表达蛋白发酵、蛋白纯化平台工艺,同时拥有丰富的发酵、纯化工艺优化经验;兼具极速流程化开发和深入优化开发
· 完备的蛋白质控体系,可全面评测蛋白性能
完备的发酵、纯化、蛋白评测平台
稳定的交付保障
· 1000+原核表达蛋白经验:自研+CRO
· 专业团队+平台化运行博士/硕士/本科;分子设计平台/发酵平台/纯化平台/蛋白评测平台
· 丰富的实验设备、良好的实验环境
交付标准
- DELIVERY STANDARDS -

服务内容

交付内容
周期

序列优化、菌种构建(可选)

表达质粒、序列报告
1-2周

小量摇瓶表达和蛋白纯化

蛋白样品、表达评测报告
2-3周

高密度发酵工艺优化、纯化工艺优化(可选)、
大量蛋白发酵、纯化制备

蛋白样品、COA
2-4周
过往案例
- CASE -
客户需要可溶表达大分子量蛋白,该蛋白由两个不同分子量的亚基组成,带标签可能影响生物活性,Hzymes 筛选合适的表达条件,让目的蛋白实现可溶,杂蛋白表达锐减,在未使用标签亲和的情况下,通过平台层析工艺的组合优化,最终纯化获得大小亚基复合物纯度>98%,且功能性良好。
案例1:大小亚基复合物的表达和纯化
某客户对包涵体蛋白的复性效率和活性要求较高,同时后期还有放大制备的需求,Hzymes采用平台变复性筛选工艺对该蛋白的变性和复性方式进行高通量筛选,过程监控,最终探索出可放大的变复性工艺条件,复性纯化后的蛋白纯度>95%,蛋白活性可满足客户预期。
案例2:变复性条件高通量筛选和过程质控
图1 一步层析及二步层析
图2 三步层析
Lane M: Molecular weight marker
Lane S: Supernatant of cell lysate
Lane E1: Elution of first chromatograpy
Lane E2: Elution of second chromatograpy
Lane E3: Elution of third chromatograpy
图1 高通量筛选
图2 复性条件优化
图3 HPLC监控变复性过程
图4 SDS-PAGE监控变复性过程
Lane M: Molecular weight marker
Lane 1: Before protein renaturation
Lane 2: During protein renaturation
Lane 3: After protein renaturation
S
E1
E2
M
E3
M
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