Messenger RNA(mRNA)是一种单链长核糖核酸,于1961年被发现,能够传递DNA中的遗传信息,经过翻译合成蛋白质。天然的mRNA是在真核细胞中通过RNA聚合酶转录细胞核中的DNA而产生的。这些mRNA分子被运输出细胞核到细胞质中,在那里它们作为模板,被核糖体翻译以产生特定的蛋白质,这样,储存在细胞核中的信息就被用来产生特定的蛋白质。

       体外转录(IVT)的mRNA可以通过在宿主(如大肠杆菌)中扩增的DNA质粒作为模板,以体外转录(IVT)的方式来制备。模板质粒需要经过设计,包含特定体外转录原件、mRNA所需元件及线性化的酶切位点。质粒经过酶线性化和纯化后,以线性化的质粒作为模板,通过体外转录(IVT)大规模生产mRNA。

       所生产mRNA纯化后配制成药品。通常mRNA疫苗药物产品会嵌在脂质纳米颗粒(LNP)中,LNP保护mRNA免被降解,并帮助mRNA通过内吞作用进入细胞。一旦进入核内体,mRNA疫苗分子就会从核内体逃逸到细胞质中,开始翻译特定的蛋白。

       mRNA自1961年被发现以来,由于稳定性低,未受较多关注。随着人们对mRNA的了解逐渐深入,及体外转录、递送等技术日益发展,已成为疾病治疗预防领域的理想平台。mRNA除了由自体细胞表达特定蛋白外,不能产生任何其他蛋白质,不需要进入细胞核就能发挥功能,相较传统生化药物,通过体外转录生产的mRNA药物及疫苗在不改变化学特性的前提下,可以通过改变序列表达几乎任何蛋白质,使得药物成分成为药品或者疫苗产品的一个模块。这个特点让mRNA疫苗及药物研发平台更具灵活性、研发周期更短、工艺复杂度更低,诸多优点使mRNA成为应对未来大流行病以及狂犬病、寨卡病毒和巨细胞病毒感染等其他传染病的一种有希望的解决方案,并且一些基于mRNA的产品也在临床中,被尝试用于各种癌症治疗。


线性化模板制备


产品名称

产品货号
BsaI限制性内切酶
BspQI限制性内切酶
生产通常使用线性化后的质粒作为IVT模板,实验室级别可选择PCR产物;质粒线性化推荐使用IIS型限制性内切,如BsaI、BspQI 等,酶切后poly(A)尾后无多余序列。
-mRNA疫苗及药物相关原料及质控试剂盒-
-基于原料的整体方案-

       T7 RNA聚合酶是mRNA生产的核心酶,T7 RNAP的改造依旧是目前热门的研究领域。瀚海新酶针对T7 RNA聚合酶改造筛选不同突变体,开发了低dsRNA、耐高温、高转录效率等多种T7 RNA聚合酶突变体及相应反应体系,满足客户不同的使用需求,并且提供mRNA合成全套物料和基于物料提供mRNA合成全流程解决方案,助力客户药物及疫苗开发过程,帮助客户在mRNA生产关键步骤获得更高产量和完整度的产物。


mRNA合成


产品名称

产品货号
T7 RNA聚合酶
T7 RNA聚合酶(低dsRNA)
HBP000340
耐热T7 RNA聚合酶
HBP000350
RNase抑制剂
HBP000401
无机焦磷酸酶(酵母)
HBP000501
ATP sodiumsolution
HBP001900
GTP sodiumsolution
HBP002000
CTP sodiumsolution
HBP002100
UTP sodiumsolution
HBP002200
Pseudo UTP sodiumsolution
HBP002400
N1-Me-Pseudo UTP sodiumsolution
HBP002500
高产T7体外转录试剂(N1-Me-pUTP)
HBP001505
高产T7体外转录试剂(pUTP)
HBP001506
共转录加帽T7体外转录试剂(pUTP,CAP GAG(3'OMe))
HBP001507
共转录加帽T7体外转录试剂(pUTP,CAP GAG)
HBP001508
共转录加帽T7体外转录试剂(N1-Me-pUTP,CAP GAG(3'OMe))
HBP001509
共转录加帽T7体外转录试剂(N1-Me-pUTP,CAP GAG)
HBP001510
高产T7体外转录试剂(低dsRNA)
HBP001511
高产T7体外转录试剂 (耐高温)
HBP001512
将线性化模板与T7 RNAP、Ppase、RNase inhibitor、NTP等在合适的缓冲buffer体系及温度下孵育,进行体外转录。可将转录体系中的NTP替换为修饰核苷。

质粒模板消化


产品名称

产品货号
DNase1
IVT反应结束后,可使用DNase I对所加入的质粒模板进行消化。
mRNA合成完毕,需添加帽结构,使mRNA更加稳定,并可以良好行使生物学功能,加帽方式可选择共转录法加帽,在转录体系加入帽子类似物,在转录过程中进行加帽。也可以选择转录完成后使用牛痘病毒加帽酶和mRNA Cap2'-O-甲基转移酶进行酶法加帽。
制备完成的mRNA需要进行纯化去除体系中的杂质,并将mRNA包进递送系统中,制备成最终的制剂,现在常用的递送系统为脂质纳米颗粒。瀚海新酶可提供多种成品mRNA,助力客户纯化工艺及递送系统的开发

mRNA包封及纯化


产品名称

产品货号
COVID-19 RBD(1000nt) mRNA
HBPM00001-1
COVID-19 RBD(1000nt) mRNA(修饰)
HBPM00001-1
COVID-19 RBD(1000nt) mRNA(纯化专用)
HBPM00001-5
COVID-19 Spike (4000nt) mRNA
HBPM00002-1
COVID-19 Spike (4000nt) mRNA(修饰)
HBPM00002-3
COVID-19 Spike (4000nt) mRNA(纯化专用)
HBPM00002-5
eGFP mRNAHBPM00003-1
eGFP mRNA(修饰)
HBPM00003-3
Fluc mRNA
HBPM00004-1
Fluc mRNA(修饰)
HBPM00004-3
环状 eGFP RNA
HBPM00101-1
环状 eGFP RNA(修饰)HBPM00101-3

质检质控


产品名称

产品货号
DNase 检测试剂盒(荧光探针法)
RNase 检测试剂盒(荧光探针法)
HBP003001
E.coli细胞残留DNA检测试剂盒
HBP003503
双链RNA(dsRNA) 检测试剂盒(ELISA法)
HBP003801
T7 RNA聚合酶残留检测试剂盒
HBP006001
mRNA加帽率检测前处理试剂盒HBP005001
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