酵母表达系统蛋白制备服务
- SERVICE -

酵母表达系统蛋白制备服务

酵母表达系统结合了原核和高等真核系统的优点,培养条件简单,生长速度快,表达水平高,蛋白质翻译后可正确加工,修饰和合理折叠,可实现分泌表达或胞内表达,是重组真核蛋白生产的理想表达系统。

瀚海新酶具备完备的酵母表达和高通量筛选平台,提供高拷贝细胞株筛选、蛋白表达、生产放大等一站式服务。

200+酵母胞内/分泌表达蛋白经验,丰富的工业化经验积累,技术成熟
拥有酵母发酵表达平台工艺和蛋白纯化平台工艺,同时拥有丰富的工业化发酵和纯化工艺优化经验,兼具极速化流程开发和深入优化开发的能力
拥有多样化载体库(pPICZα A、pYAM75P、pPIC9K、 pGAPZa等)和不同类型的宿主细胞库(X33、GS115、SMD1168、KM71等)可适配不同特征的蛋白的表达
完备的实验设备、完整功能分区的实验场地,300+研发设备支撑多样化客户需求
通用性广、安全性高、稳定、表达效率高;可实现分泌表达、胞内表达;可实现易降解蛋白的表达;良好的翻译后修饰
专业人员+平台保障:博士/硕士/本科梯队完善;分子设计平台/发酵平台/纯化平台/蛋白评测平台化运营,保障服务的稳定快速交付
· 技术流程 ·
交付标准
- DELIVERY STANDARDS -

服务内容

交付内容
周期

序列优化、酵母表达载体构建(可选)

表达质粒、序列报告
2-3周

多拷贝细胞株的筛选(可选)

/
1-2周

小量摇瓶表达和蛋白纯化

蛋白样品、表达评测报告
2-3周

发酵工艺优化、纯化工艺优化(可选)大量蛋白发酵、纯化制备

蛋白样品、COA4-6周
过往案例
- CASE -
客户需要分泌表达糖基化的蛋白,但是尝试多次均发现目的蛋白存在持续降解的情况,最终获得的产物纯度低、活性和稳定性极差,采用Hzymes 特有的酵母表达体系后,目的蛋白在发酵过程中表现出良好的稳定性,最终帮客户富集到目的蛋白,比活力提升5倍,纯度高达95%。
案例1:易降解蛋白的发酵表达工艺
客户使用大肠和哺乳细胞表达某蛋白后均未获得预期活性,经分析后发现该蛋白存在一定程度糖基化修饰,同时含较多二硫键,推荐客户采用酵母表达体系后,分别对应设计了胞内和胞外分泌表达的路径,最终纯化富集了目的蛋白,客户检测活性良好。
案例2:其它体系表达困难的活性蛋白表达
Lane M: Molecular weight marker
Lane 1: Fermentation supernatant before optimization
Lane 2: Fermentation supernatant after optimization
Lane M: Molecular weight marker
Lane 1: Target Protein
图1 优化前后发酵上清
案例1:胞外分泌表达
KDa
理论分子量: 67.7kDa
糖基化修饰后的表观分子量:100-130kDa
案例2:胞内表达
理论分子量: 65.3kDa
表观分子量:60-70kDa
图2 目的蛋白富集SDS-PAGE
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